通常所使用的ELISA試劑盒或其它試劑，必須是經國家食品藥品監督管理局注冊批準、批檢合格、臨床評估質量優良，并且均在有效期內使用。
1、ELISA試劑盒的選擇不同批號試劑組分不得混用，過期的試劑一律不得使用，首先提升。
2、 ELISA試劑盒樣品的采集與保存
用于檢測的標本應保持新鮮，標本的采集應盡量避免溶血，因紅細胞破裂可釋放過氧化物酶活性物質，干擾結果，會出現假陽性；標本如果受細菌污染，會因菌體中含有內源性過氧化物酶而出現假陽性；混濁或有沉淀的血清樣品應離心，待澄清后方可檢測，避免對結果造成影響。
用于HIV抗體檢測的血清或血漿樣品應存放于-20 ℃以下，短期（1周內）進行檢測的樣品可存放于2 ℃～8 ℃。融解時應上下顛倒充分混勻，動作要輕緩，避免產生氣泡。同時應注意避免樣品反復凍融，否則會造成樣品抗體效價降低，影響其結果。
3、 加樣
加樣前應注意將微孔板條從冷藏環境中取出放置室溫，待試劑平衡后方可使用，未用完者需放入有干燥劑的密封袋中保存。整個HIV抗體檢測必須符合《全國艾滋病檢測技術規范》，嚴格防止交叉感染。操作時必須戴手套、穿工作衣，嚴格執行消毒隔離制度。
加樣要用微量移液器ELISA試劑盒（要求準確性高并定期進行校正），ELISA試劑盒按規定的量加入孔內，避免加在孔壁的邊緣，垂直加樣，不要使吸頭碰到酶標板孔上的已包被的抗原，加樣時盡量慢吸快放，同時注意不要濺出，避免產生氣泡。