在歷史的進化過程中被自然選擇清除掉；還有一部分微生物會對人體造成傷害，但卻不會導致宿主出現非常嚴重的癥狀，更不會導致宿主迅速死亡，于是就被留存下來，與人類一起進化。有些微生物在進化過程中，些錯誤的結果.引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有：標本因素；試劑因素；操作因素.
樣品稀釋 一般產品的樣品稀釋倍數均通過大量試驗確定,以保證試驗的靈敏度和特異性.酶聯免疫反應是一種敏感性很高的反應,如果血清不稀釋,不可避免會產生很強的非特異性反應,出現假陽性.
試劑盒平衡 后的樣品必須充分混勻,所有試劑在加樣前也須搖勻,以保證試驗的均一性.加樣是一項很重要的步驟.加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,ELISA試劑盒不可濺出和產生氣泡.加樣太快,無法保證微量加樣的準確性和均一性.加在孔壁上部的非包被區,易導致非特異吸附.溫育是ELISA試劑盒測定中影響測定成敗zui為關鍵的一個因素.ELISA作為一種固相免疫測定,抗原抗體的結合反應在固相上進行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原*結合,必須在一定的溫度條件下反應一定的時間.一種生物或生理活性物質，ELISA試劑盒只要有辦法得到其特異的抗體，就可以建立這種物質的酶聯免疫測定方法。
    詳細的試驗不僅有堅固的理論也要實踐。理論是實踐的基礎，實踐是理論的運用。但終究選用什么，要依據試驗詳細來實踐。在做ELISA試劑盒試驗時，包被原的性質很重要，蛋白濃度，是否降解，這關系到你做出的抗體可不可以被其識別，所以保留抗原很重要。ELISA試劑盒而封鎖就是讓大量不相關的蛋白質充填這些曠地空閑，從而排斥ELISA后的步驟中干擾物質的再吸附。因此包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來包。
    ELISA試劑盒標本檢測應注意以下幾點：
血清標本：注意避免溶血；標本應在新鮮時檢測；標本體積：100微升×檢測指標種類，如需做復孔，標本則兩倍收集。
    稀釋度：對于作某一具體指標來說，ELISA試劑盒事先做好系列稀釋度的指標測定，得出實驗有意義的    稀釋度，然后選擇一個的稀釋度測定即可；ELISA試劑盒樣本存儲：當天要檢測的標本，儲存在4℃備用，如需周期收集標本，標本則應及時    分裝后于-20℃或-70℃條件保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時，-20℃可保存1    個月。-70℃可保存6個月。激素類標本需添加抑肽酶；
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