為了保持hESC存活且具有多能性，研究人員通常在滋養層細胞（也就是一層小鼠胚胎成纖維細胞）上培養，或者在微載體上成簇培養。但是在這些基質上培養干細胞是相當昂貴的，而且培養物不能在很長時間內保持未分化狀態，盡管所有必需的生長因子都存在。

 Reubinoff的研究團隊正在研究hESC簇分化成神經細胞，他們一直在使用Invitrogen的Neurobasal培養基。這種培養基能夠在無滋養層的條件下長時間維持神經細胞的生長和正常表型。在研究過程中，研究人員注意到并非所有細胞都分化了。他們懷疑是培養基的選擇導致了這種現象，于是他們開始集中精力研究培養基如何促進干細胞生長并抑制分化。

 使用這種新的培養基，研究小組檢驗了三種不同的hESC系。他們利用熒光激活細胞分選（FACS）在7周和20周后分析了培養物，發現90%的細胞仍維持多能性。這項突破為在計算機化的自動系統中大規模擴增胚胎干細胞創造了可能性。此外，通過改變培養條件，還可能進一步指導干細胞長成特定的細胞類型，用于研究或病人的移植。

 為了驗證他們的理論，研究小組定制了培養基。他們在Neurobasal培養基中加入了血清替代物，還加入了干細胞生長所需的蛋白，包括細胞外基質組分、神經營養因子、成纖維細胞生長因子2和活化素A。研究人員在常規的無血清培養基和定制培養基中培養了hESC。三個星期之后，定制培養基中存在更多的未分化hESC細胞。

 然而，研究小組也承認，他們的方法并不。在細胞傳代過程中，他們丟失的細胞數是滋養層培養方法的近3倍。他們還將繼續完善這種技術，以確保培養產量盡可能地高。