ELISA試劑盒每種試劑都有其反響形式，其間溫度和溫育時刻操控是重要因素。因孵育溫度高，反響時刻長，會構成整板本底高，陽性率高。
溫育通常用濕盒或水浴，ELISA試劑盒反響板不宜疊放，以保證各板溫度都能活絡平衡，為避免蒸發，板上應加蓋。作為記載測定作用的儀器，酶標儀的功用安穩與否，抉擇作用的牢靠度。首要酶標儀應守時進行保護，對濾光片要守時校對；其次酶標儀波長設置要正確，*運用雙波長，一個檢查波長，一個參比波長，以消除微孔板底部劃痕、不平、指印或液面高度差異構成的光煩擾。此外，ELISA試劑盒在用酶標儀讀數時*先擦試微孔板底部并壓平板條。因為各種酶標儀功用有所不同，運用中應具體閱覽說明書。
ELISA試劑盒綜上所述，盡管現在上以及我國有了有些標準血清或參比血清（血清盤），但是酶聯免疫吸附技術現在在技術上沒有做到標準化。受辦法學及技術條件的約束，在酶聯免疫吸附測定中有時不行避免的會出現必定的非特異性，ELISA試劑盒我們能夠通過以上辦法把非特異性顯色降至zui低限底，然后行進檢查的特異性，并得到更準確、牢靠的實驗作用。